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¿Cuáles son las funciones del kit ELISA?
2022-12-23
El kit ELISA se basa en la fase sólida del antígeno o anticuerpo y el marcaje enzimático del antígeno o anticuerpo. El antígeno o anticuerpo unido a la superficie del soporte sólido aún retiene su actividad inmunológica, y el antígeno o anticuerpo marcado con enzima retiene tanto su actividad inmunológica como la actividad enzimática. En el momento de la determinación, la muestra bajo prueba (en la que se mide el anticuerpo o antígeno) reacciona con el antígeno o anticuerpo en la superficie del soporte sólido. El complejo antígeno-anticuerpo formado en el soporte sólido se separa de otras sustancias en el líquido mediante lavado.
Se añaden antígenos o anticuerpos marcados con enzimas, que también se unen al soporte sólido por reacción. En este momento, la cantidad de enzima en la fase sólida es proporcional a la cantidad de sustancia en la muestra. Después de agregar el sustrato de la reacción enzimática, el sustrato es catalizado por la enzima para convertirse en productos coloreados. La cantidad de producto está directamente relacionada con la cantidad de sustancia ensayada en la muestra, por lo que se pueden realizar análisis cualitativos o cuantitativos según la profundidad del color.
La alta eficiencia catalítica de las enzimas amplifica indirectamente los resultados de la respuesta inmune, lo que hace que el ensayo sea muy sensible. ELISA se puede usar para determinar antígenos, pero también se puede usar para determinar anticuerpos.
Principios básicos del kit ELISA
Utiliza una reacción específica de antígeno y anticuerpo para conectar el objeto a la enzima y luego produce una reacción de color entre la enzima y el sustrato para la determinación cuantitativa. El objeto de la medida puede ser un anticuerpo o un antígeno.
Hay tres reactivos necesarios en este método de determinación:
â Antígeno o anticuerpo en fase sólida (adsorbente inmunitario)
â¡ Antígeno marcado con enzima o anticuerpo (marcador)
⢠sustrato para la acción enzimática (agente de desarrollo de color)
En la medición, el antígeno (anticuerpo) se une primero al soporte sólido, pero aún conserva su actividad inmunológica, y luego se agrega un conjugado (marcador) de anticuerpo (antígeno) y enzima, que aún conserva su actividad inmunológica y enzima originales. actividad. Cuando el conjugado reacciona con el antígeno (anticuerpo) en el soporte sólido, se agrega el sustrato correspondiente de la enzima. Es decir, hidrólisis catalítica o reacción REDOX y color.
Se añaden antígenos o anticuerpos marcados con enzimas, que también se unen al soporte sólido por reacción. En este momento, la cantidad de enzima en la fase sólida es proporcional a la cantidad de sustancia en la muestra. Después de agregar el sustrato de la reacción enzimática, el sustrato es catalizado por la enzima para convertirse en productos coloreados. La cantidad de producto está directamente relacionada con la cantidad de sustancia ensayada en la muestra, por lo que se pueden realizar análisis cualitativos o cuantitativos según la profundidad del color.
La alta eficiencia catalítica de las enzimas amplifica indirectamente los resultados de la respuesta inmune, lo que hace que el ensayo sea muy sensible. ELISA se puede usar para determinar antígenos, pero también se puede usar para determinar anticuerpos.
Principios básicos del kit ELISA
Utiliza una reacción específica de antígeno y anticuerpo para conectar el objeto a la enzima y luego produce una reacción de color entre la enzima y el sustrato para la determinación cuantitativa. El objeto de la medida puede ser un anticuerpo o un antígeno.
Hay tres reactivos necesarios en este método de determinación:
â Antígeno o anticuerpo en fase sólida (adsorbente inmunitario)
â¡ Antígeno marcado con enzima o anticuerpo (marcador)
⢠sustrato para la acción enzimática (agente de desarrollo de color)
En la medición, el antígeno (anticuerpo) se une primero al soporte sólido, pero aún conserva su actividad inmunológica, y luego se agrega un conjugado (marcador) de anticuerpo (antígeno) y enzima, que aún conserva su actividad inmunológica y enzima originales. actividad. Cuando el conjugado reacciona con el antígeno (anticuerpo) en el soporte sólido, se agrega el sustrato correspondiente de la enzima. Es decir, hidrólisis catalítica o reacción REDOX y color.
El tono de color que produce es proporcional a la cantidad de antígeno (anticuerpo) a medir. Este producto coloreado se puede observar a simple vista, microscopio óptico, microscopio electrónico, también se puede medir con un espectrofotómetro (instrumento de marcaje de enzimas). El método es sencillo, cómodo, rápido y específico.
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