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¿Por qué el cultivo celular lisa primero los glóbulos rojos?
2022-12-23
Introducción básica
El lisado de eritrocitos es uno de los métodos más simples y fáciles para eliminar los glóbulos rojos, es decir, dividir los glóbulos rojos con lisado, que no daña las células nucleadas y puede eliminar completamente los glóbulos rojos. La escisión de lisado es un método suave de eliminación de glóbulos rojos, que se utiliza principalmente para la separación y purificación de células tisulares dispersadas por digestión enzimática, la separación y purificación de linfocitos y la eliminación de glóbulos rojos en los experimentos de proteína tisular y ácido nucleico. extracción ácida. Las células tisulares obtenidas mediante el lisado de glóbulos rojos no contienen glóbulos rojos y pueden utilizarse para cultivos primarios, fusión celular, citometría de flujo, separación y extracción de ácidos nucleicos y proteínas, etc.
Instrucciones de uso
Muestra de células de tejido
1. Los tejidos frescos se digirieron con páncreas/enzima o colagenasa y se dispersaron en una suspensión de células individuales, y el sobrenadante se descartó mediante centrifugación.
2. Saque el lisado ELS del refrigerador a 4â, agregue el lisado ELS al precipitado celular en una proporción de 1:3-5 (agregue 3-5 ml de lisado a 1 ml de células compactadas), sople suavemente y mezcle.
3. Centrifugar a 800-1000 rpm durante 5-8 minutos y desechar el líquido transparente rojo superior.
4. La parte precipitada se recogió y se centrifugó con solución de Hank o solución de cultivo sin suero durante 2-3 veces.
5, si el agrietamiento no está completo/completo, se pueden repetir los pasos 2 y 3.
6. Celdas de resuspensión para experimentos posteriores; Si se extrae el ARN, es mejor hacerlo en la solución preparada en el Paso 4 usando agua DEPC
El lisado de eritrocitos es uno de los métodos más simples y fáciles para eliminar los glóbulos rojos, es decir, dividir los glóbulos rojos con lisado, que no daña las células nucleadas y puede eliminar completamente los glóbulos rojos. La escisión de lisado es un método suave de eliminación de glóbulos rojos, que se utiliza principalmente para la separación y purificación de células tisulares dispersadas por digestión enzimática, la separación y purificación de linfocitos y la eliminación de glóbulos rojos en los experimentos de proteína tisular y ácido nucleico. extracción ácida. Las células tisulares obtenidas mediante el lisado de glóbulos rojos no contienen glóbulos rojos y pueden utilizarse para cultivos primarios, fusión celular, citometría de flujo, separación y extracción de ácidos nucleicos y proteínas, etc.
Instrucciones de uso
Muestra de células de tejido
1. Los tejidos frescos se digirieron con páncreas/enzima o colagenasa y se dispersaron en una suspensión de células individuales, y el sobrenadante se descartó mediante centrifugación.
2. Saque el lisado ELS del refrigerador a 4â, agregue el lisado ELS al precipitado celular en una proporción de 1:3-5 (agregue 3-5 ml de lisado a 1 ml de células compactadas), sople suavemente y mezcle.
3. Centrifugar a 800-1000 rpm durante 5-8 minutos y desechar el líquido transparente rojo superior.
4. La parte precipitada se recogió y se centrifugó con solución de Hank o solución de cultivo sin suero durante 2-3 veces.
5, si el agrietamiento no está completo/completo, se pueden repetir los pasos 2 y 3.
6. Celdas de resuspensión para experimentos posteriores; Si se extrae el ARN, es mejor hacerlo en la solución preparada en el Paso 4 usando agua DEPC
Los glóbulos rojos tienen un ciclo de vida muy corto, solo 120 días, pero reproducen la sangre muy rápido y, en este caso, son particularmente capaces de dividirse y son las células que se dividen más rápido de todas, por lo que esta célula es muy valiosa. por lo que es muy útil para el cultivo celular. Es muy simple, no tiene orgánulos, solo membranas celulares y proteínas.
