Elegir el material de cultivo adecuado es crucial para garantizar un crecimiento celular óptimo y resultados experimentales. Al elegir recipientes de cultivo celular, es importante considerar factores como el tipo de célula, el propósito específico de su cultivo, la escala del cultivo, el tipo de medio de cultivo, los materiales y el tamaño de los recipientes, los tratamientos de superficie, las tapas para una adecuada intercambio de gases y su compatibilidad con el equipo de su laboratorio.
Estos son los factores clave a considerar al seleccionar el recipiente de cultivo celular adecuado
1. Elija el recipiente de cultivo celular según el tipo de células.
Células adherentes
Estas células necesitan una superficie a la que adherirse y extenderse. Para las células adherentes, necesitará vasos con una superficie que proporcione suficiente espacio para la unión y el crecimiento de las células.
Ejemplos Matraces, placas de Petri y placas de varios pocillos tratados con cultivo de tejidos.
Células en suspensión
Estas células crecen flotando en el medio, por lo que no se considera una superficie.
2. Elija el recipiente de cultivo celular según el tamaño (capacidad de volumen)
Culturas a pequeña escala
Para experimentos a pequeña escala o cribados de alto rendimiento, los recipientes más pequeños son ideales.
Ejemplos Placas multipocillos (placas de cultivo de 6, 24 y 96 células),
placas de petri, o matraces T25.
Culturas a gran escala
Si necesita cultivar grandes cantidades de células, es mejor utilizar recipientes más grandes o biorreactores.
Ejemplos Matraces de cultivo celular T75 y T175, biorreactores o matraces giratorios para cultivos celulares en suspensión.
3. Elija el recipiente de cultivo celular según el tratamiento de la superficie.
Superficies tratadas con cultivo de tejidos
Los vasos se tratan previamente para promover la unión celular, lo que los hace adecuados para tipos de células adherentes. Generalmente están recubiertos con sustancias como colágeno, fibronectina u otros componentes de la matriz extracelular.
Superficies no tratadas
Ideal para cultivos en suspensión o cuando las células no necesitan adherirse a la superficie. Suelen utilizarse para células que crecen libremente en el medio.
4. Elija el recipiente de cultivo celular según el material.
Poliestireno comúnmente utilizado para aplicaciones de cultivo celular estándar. Es transparente, permite una fácil inspección visual y funciona bien tanto para células adherentes como para células en suspensión.
El policarbonato o el polipropileno se utilizan para determinadas aplicaciones de biorreactores y para recipientes que requieren más flexibilidad o tratamientos superficiales específicos.
El vidrio utilizado para el cultivo de tejidos estándar debido a su costo y su fragilidad, los recipientes de vidrio pueden ser adecuados para aplicaciones específicas o cultivos a gran escala.
matraces
Para el cultivo celular general, se utilizan habitualmente matraces T (T25, T75, T150). La superficie plana proporciona una buena zona para la unión y el crecimiento de las células. Se pueden utilizar tanto para células adherentes como para cultivos en suspensión si se mantienen las condiciones adecuadas.
Placas de Petri
Común para cultivos a pequeña escala y para experimentos que requieren observación, como ensayos de formación de colonias.
Placas multipocillos
Son útiles para la detección de alto rendimiento y experimentos a menor escala. Placas con 6, 12, 24, 48,
96, o 384 pocillos están disponibles y son ideales para ensayos basados en células, liberación de citocinas, pruebas de fármacos y otras aplicaciones de alto rendimiento.
Frascos giratorios
Se utiliza para cultivos celulares en suspensión, particularmente en volúmenes grandes donde es necesaria una agitación controlada para mantener el crecimiento celular y evitar la aglomeración celular.
Biorreactores
Para el cultivo en suspensión a gran escala, los biorreactores permiten un control más complejo de las condiciones ambientales (p. ej., pH, temperatura, oxigenación) y se utilizan para producción de gran volumen, como en la fabricación biofarmacéutica.
6. Elija el recipiente de cultivo celular según la esterilidad y la ventilación.
Esterilidad
Asegúrese de que el recipiente esté estéril o haya sido esterilizado para evitar la contaminación. La mayoría de los recipientes de cultivo comerciales están preesterilizados, pero siempre revise el embalaje.
Ventilación
Algunos recipientes, como los matraces, vienen con tapas o filtros con ventilación para permitir el intercambio de aire y evitar la contaminación. Esto es esencial cuando se cultivan células en condiciones de alta densidad.
7. Elija el recipiente de cultivo celular según su conveniencia de uso.
Esterilizable en autoclave versus desechable
Algunos recipientes de cultivo se pueden esterilizar en autoclave para su reutilización (p. ej., botellas de vidrio, ciertos matraces de plástico), mientras que otros son de un solo uso y desechables (p. ej., placas de Petri de plástico, placas de pocillos múltiples).
Manipulación y Transporte
Considere la facilidad de transferir células entre vasos. Por ejemplo, las placas multipocillos pueden requerir placas especializadas para un fácil manejo con equipos como pipetas automáticas.
8. Elija el recipiente de cultivo celular según el volumen del medio de cultivo.
Elija un recipiente que pueda acomodar el volumen deseado de medio de cultivo sin desperdiciar recursos. Si se trabaja con un cultivo de gran volumen, pueden ser necesarios matraces o biorreactores más grandes, mientras que los volúmenes más pequeños son adecuados para placas o platos de cultivo celular.
9. Elija el recipiente de cultivo celular según consideraciones de costos
Desechable versus reutilizable
Los recipientes de plástico desechables son rentables y reducen el riesgo de contaminación, pero pueden resultar costosos para operaciones a gran escala. Los recipientes de vidrio reutilizables tienen un costo inicial más alto, pero pueden esterilizarse y reutilizarse varias veces, lo que los hace más económicos para un uso a largo plazo.
Eficiencia de volumen
Asegúrese de que el tamaño del recipiente sea apropiado para evitar el desperdicio de materiales, especialmente cuando se utilizan reactivos o medios de crecimiento costosos.
10. Elija el recipiente de cultivo celular según los requisitos de aplicación específicos
Imágenes
Si necesita visualizar células bajo un microscopio, elija recipientes con materiales ópticamente transparentes y dimensiones adecuadas para su configuración de imágenes (por ejemplo, placas multipocillos para detección de alto contenido o placas con fondo de vidrio para imágenes de células vivas).
Agitación controlada
Para cultivos de células en suspensión, considere matraces giratorios o biorreactores que proporcionen agitación controlada para mantener las células suspendidas uniformemente.
Conclusión
Elegir el recipiente de cultivo celular adecuado requiere equilibrar varios factores, incluido el tipo de célula, la escala de cultivo, la compatibilidad del material y las necesidades experimentales específicas. Las células adherentes requerirán superficies que promuevan la unión, mientras que las células en suspensión se beneficiarán de mayores volúmenes y agitación. Para trabajos a pequeña escala, las placas de varios pocillos o los matraces T pueden ser suficientes, mientras que los cultivos más grandes pueden requerir matraces giratorios o biorreactores. Asegúrese siempre de que los recipientes cumplan con sus requisitos de esterilidad y manipulación, y considere la rentabilidad en función de su uso.
Al considerar estos factores, puede seleccionar el recipiente óptimo que proporcione las condiciones adecuadas para su cultivo celular y sus objetivos experimentales.